成果介绍：

本成果创新性地将滤膜与限域扩增相结合，研究滤膜原位LAMP扩增技术，用于无菌水中细菌数量的快速检测。研究合适的纳米孔膜作为过滤目标微生物的载体，同时研发薄膜表面原位LAMP扩增体系。利用水凝胶多孔材料的纳米限域效应，限制滤膜表面目标细菌基因扩增产物的自由移动，导致原位扩增产生的大量DNA片段无法顺利扩散，从而富集在薄膜原始位置，形成荧光亮斑（1个荧光点对应一个菌落），50分钟内实现传统菌落数到新型荧光点数的转变，实现大体积毫升级水样（1-1000 mL）中细菌的准确计数，保障无菌水安全。

成果团队：浙江大学团队

成果应用领域：药品/医疗器械/卫生用品类生产企业

成果转化方式：技术转让/许可、联合开发等均可

成果核心优势：

建立了基于水凝胶-滤膜的LAMP检测技术（idLAMP）。选择孔径为400 nm的聚碳酸酯膜作为滤膜，浓度为10 %的聚乙二醇（PEG）水凝胶进行纳米限域扩增，最终形成直径约为300mm扩增荧光点用于细菌计数。检测值与实际值具有良好的线性关系（R2=0.9998），在30 min内实现对100 mL样品中大肠杆菌的定量检测，检测限为0.09 cell/mL。

idLAMP技术可直接用于大体积无菌水中的大肠杆菌和沙门氏菌检测，与传统平板培养发相比，具有更低的检测限，更好的抗干扰性和重复性，更重要的是，更短的检测。